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11-272025
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脯氨酸對(duì)中華鱉受損裙邊細(xì)胞生長及膠原代謝的影響
摘要：脯氨酸是動(dòng)物的條件性必需氨基酸，具有重要的營養(yǎng)、代謝和免疫功能。為探究脯氨酸對(duì)中華鱉裙邊細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響及作用機(jī)制，以中華鱉胚胎期裙邊成纖維細(xì)胞為研究對(duì)象，建立脂多糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激模型，并在細(xì)胞培養(yǎng)體系中添加脯氨酸，分為正常對(duì)照組、脂多糖組和脯氨酸+脂多糖組，通過噻唑藍(lán)(MTT)、蘇木精-伊紅(HE)染色，DCFH-DA探針及實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法，測定細(xì)胞活力、活性氧含量及膠原代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平。試驗(yàn)結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，脂多糖組中華鱉應(yīng)激細(xì)胞的數(shù)量和存活率顯著下降，活性氧水平極顯著上升；膠原合成相關(guān)基因Col1α1、Col1α2、Col3α1的mRNA表達(dá)豐度顯著降低(P<0.05),膠原降解相關(guān)基因MMP1、MMP18的mRNA表達(dá)顯著提高(P<0.05),相應(yīng)地，膠原降解關(guān)鍵酶MMPs特異性抑制因子TIMP2、TIMP3和TIMP4的mRNA水平顯著下降(P<0.05)。與脂多糖組相比，添加脯氨酸顯著促進(jìn)了中華鱉應(yīng)激細(xì)胞的生長增殖(P<0.01),顯著降低活性氧含量(P<0.05),顯著降低膠原降解相關(guān)基因MMP18的mRNA表達(dá)(P<0.05),并顯著升高膠原合成相關(guān)基因Col3α1、MMPs特異性抑制因子TIMP2和TIMP3的mRNA相對(duì)表達(dá)豐度(P<0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明，脯氨酸能夠緩解脂多糖誘導(dǎo)的中華鱉裙邊細(xì)胞氧化應(yīng)激，可能通過改變活性氧信號(hào)通路、調(diào)節(jié)膠原代謝相關(guān)酶MMPs及其特異性抑制因子TIMPs的表達(dá)從而發(fā)揮作用。本試驗(yàn)初步揭示了脯氨酸對(duì)脂多糖誘導(dǎo)損傷的中華鱉裙邊細(xì)胞生長及膠原代謝的影響，可為應(yīng)用脯氨酸等同類功能性氨基酸提升中華鱉的抗應(yīng)激能力提供理論依據(jù)。  還原


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